Phương tiện qua hầm Thủ Thiêm, xe ô tô con và ô tô khách được lưu thông 24/24 giờ; xe máy lưu thông từ 6 giờ đến 21 giờ hàng ngày. Ô tô tải từ 5 tấn trở xuống được phép lưu thông từ 8 đến 16 giờ và 20 giờ đến 6 giờ; xe có trọng tải trên 5 tấn được phép lưu thông từ 21 giờ đến 6 giờ. Cấm người đi bộ, xe thô sơ, xe 3 - 4 bánh tự chế, xe vận chuyển chất thải nguy hại, xe quá khổ… lưu thông qua hầm.